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          如何選擇合適的內(nèi)參抗體?

          更新時間:2021-09-16點(diǎn)擊次數(shù):5347

          如何選擇合適的內(nèi)參抗體?


          Tips:在選擇內(nèi)參抗體時,我們需要遵循幾個原則:

          1.種屬來源
          哺乳動物的樣本需要選擇哺乳動物中穩(wěn)定表達(dá)的蛋白作為內(nèi)參,同樣的,植物樣本需要選擇植物中穩(wěn)定表達(dá)的蛋白作為內(nèi)參。


          2. 細(xì)胞定位
          靶標(biāo)蛋白的細(xì)胞定位不同,適合的內(nèi)參也不同。如全細(xì)胞裂解液可選擇beta-actin、beta-tubulin等,膜蛋白一般選擇Na K ATPase,核蛋白則選擇Lamin B1、Histone H3等。

          內(nèi)參.png

          3. 分子量
          內(nèi)參蛋白的分子量需要與目標(biāo)蛋白的分子量有所區(qū)別,否則兩者條帶無法分開。一般目的蛋白與內(nèi)參蛋白大小至少相差5K Da以上。


          4. 表達(dá)因素
          內(nèi)參選擇還需要考慮實(shí)際的實(shí)驗(yàn)環(huán)境。GAPDH是代謝類蛋白,在活組織中表達(dá)較穩(wěn)定。beta-actin和beta-tubulin是結(jié)構(gòu)蛋白,不同組織的細(xì)胞結(jié)構(gòu)會有差異性。


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